Набор предназначен для количественного определения рекомбинантного и нативного стафилококкового белка А в технологических и биологических жидкостях в интервале концентраций 0-1000 пг/мл; позволяет анализировать белок А в присутствии избытка иммуноглобулинов. Набор включает разборный 96-ячеечный микропланшет с иммобилизованными антителами, вторые антитела, конъюгат, стандартные растворы и необходимые реагенты.
Основные характеристики:
• чувствительность 30 пг/мл;
• пределы определения 5 – 1000 пг/мл;
• общее время анализа 3,5 часа;
• разборный планшет 6×16 лунок;
• объем исследуемого образца 100 мкл;
• образцы: технологические или культуральные жидкости;
• набор откалиброван по рекомбинантному белку А с М.М. 34,3 kDa, очищенному с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии;
• условия хранения - 2-8°C
Состав набора:
1. 1 разборный планшет (6×16 ячеек) с иммобилизованным моноклональными антителами (IgG1).
2. Стандартный образец белка А - 10 нг/мл, 0,5 мл, 1 фл.
3. Поликлональные антитела кролика к белку А (АТ-2), 20-кратный концентрат, 1 флакон – 1,0 мл.
4. Конъюгат пероксидазы хрена с антивидовыми поликлональными антителами (GAR-ПХ), 20-кратный концентрат, 1 флакон – 1,0 мл.
5. Буфер B для промывки планшета, 10-кратный концентрат, 2 флакона по 22 мл.
6. Буфер С для разбавления образцов, АТ-2 и конъюгата, 5-кратный концентрат, 1 фл. – 12 мл
7. Денатурирующий буфер D, 1 фл. - 20 мл.
8. Стоп-реагент, 1 флакон - 6 мл.
9. Реагент, 1 флакон- 12 мл.
10. Субстрат, 1 флакон - 12 мл.
Процедура анализа
1. Подготовка образцов.
2. Разбавление реагентов до рабочих концентраций.
3. Промывка планшета.
4. Внесение стандартов и образцов. Инкубация 1 час. Промывка 3 раза.
5. Внесение АТ-2. Инкубация 1 час. Промывка 3 раза.
6. Внесение конъюгата антивидовых антител с пероксидазой. Инкубация 20 мин. Промывка 3-4 раза.
7. Внесение субстрат-реагентной смеси. Инкубация 20 мин.
8. Внесение стоп-реагента.
9. Спектрофотометрия планшета при длине волны 450 нм.
10. Обработка результатов.
