Выделение и очистка нуклеиновых кислот

Aurum total RNA Mini – лизис образцов и инактивация РНКаз посредством гуанидин изоцианата и β-меркаптоэтанола.

Раствор для хранения РНК предназначен для ресуспендирования очищенного осадка РНК. Этот раствор для хранения РНК может эффективно минимизировать гидролиз за счет низкого pH и эффективного хелатирующего агента (цитрата натрия). по сравнению с водой, не содержащей нуклеаз, или стандартным буфером TE, раствор для хранения РНК обеспечивает большую стабильность РНК.

Основным компонентом раствора для хранения РНК является 1 мМ цитрата натрия, рН 6,5 +/-0,1.

Характеристики раствора для хранения РНК

• Транспортировка – при температуре окружающей среды;
• срок годности – 24 месяца;
• хранение – -20℃.

Протеиназа К представляет собой протеазу широкого спектра действия. Протеиназа К широко используется, обычно используется в молекулярной биологии, клеточной биологии, иммуногистохимии и других экспериментах.

Характеристики протеиназы К

• Не содержит ДНКазы, РНКазы;
• молекулярная масса, кДА – около 30;
• чистота – > 95% (по SDS-PAGE);
• удельная активность, ЕД/мг – >30.

Деионизованная вода, обработанная диэтилпирокарбонатом (ДЭПК) и отфильтрованная через мембрану 0.22 мкм. Предназначена для экспериментов с использованием РНК.

Не содержит экзо- и эндонуклеаз, а также фосфатаз.

Не предназначена для ПЦР и экспериментов in vivo.

Стерильная вода, обработанная диэтилпирокарбонатом (ДЭПК), свободная от РНКаз и ДНКаз, предназначена для работы c ДНК и РНК, приготовления растворов для молекулярно-биологических работ, проведения различных молекулярно-биологических реакций.

Условия хранения: комнатная температура.

Стерильная вода, обработанная диэтилпирокарбонатом и свободная от примесей ДНКаз и РНКаз, предназначена для использования во всех молекулярно-биологических методах, в том числе для работы с РНК.

Условия хранения: комнатная температура.

• Идеален для преципитации олигонуклеотидов (более 8 оснований) и РНК/ДНК в низкой концентрации (20 пг и более).
• Не влияет на спектральные характеристики нуклеиновых кислот.
• При концентрации до 0,4 мкг/мкл совместим с трансфекцией.
• При концентрации до 8 мкг/мкл совместим с ферментативными реакциями — ПЦР, лигированием, рестрикцией, синтезом кДНК, трансформацией, транскрипцией in vitro.
• Не влияет на электрофоретическую подвижность нуклеиновых кислот.
• Условия хранения: -20 °С.

Гликоген - полисахарид высокой степени чистоты. Выделен из двустворчатых моллюсков. Используется в качестве инертного соосадителя при преципитации нуклеиновых кислот спиртами. Он не растворим в этаноле и способствует образованию более прочного и видимого осадка нуклеиновой кислоты после центрифугирования. Гликоген более эффективен при высаживании нуклеиновых кислот, чем тРНК, линейный акриламид или фрагментированная ДНК.

Данный продукт рекомендуется в первую очередь для преципитации РНК, а также ДНК.

Идеален для преципитации олигонуклеотидов (более 8 оснований) и РНК/ДНК в низкой концентрации (20 пг и более).

Не влияет на спектральные характеристики нуклеиновых кислот.

При концентрации до 0.4 мкг/мкл совместим с трансфекцией.

При концентрации до 8 мкг/мкл совместим с ферментативными реакциями - ПЦР, лигированием, рестрикцией, синтезом кДНК, трансформацией, транскрипцией in vitro.

Не влияет на электрофоретическую подвижность нуклеиновых кислот.

Условия хранения: -20^оС

ДНКаза I — это эндонуклеаза расщепляющая одноцепочечную и двухцепочечную ДНК, образуя ди-, три- и олигонуклеотидные продукты с 5'-фосфатной и 3'-OH группами на концах. Фермент рекомбинантный, не содержит РНКаз. Активность фермента строго зависит от присутствия Ca²⁺ и активируется ионами Mg²⁺ или Mn²⁺.

• Получение препаратов РНК свободных от примесей ДНК;
• удаление матричной ДНК после транскрипции in vitro;
• получение РНК свободной от ДНК перед ОТ-ПЦР и ОТ-кПЦР;
• мечение ДНК ник-трансляцией в сочетании с ДНК-полимеразой I;
• исследования ДНК-белковых взаимодействий с помощью ДНКазы I.

Комплект поставки: ДНКаза I, 10х буфер для проведения реакции, 50 mM ЭДТА pH 8,0.

Условия хранения: -20 °С.

ДНКаза I - эндонуклеаза, расщепляющая одно- и двухцепочечную ДНК. Она гидролизует фосфодиэфирные связи, что приводит к образованию олигодезоксинуклеотидов и монодезоксинуклеотидов с 5’-фосфатом и 3’-OH.

Так как фермент рекомбинантный, его раствор не содержит РНКаз.

Активность ДНКазы I зависит от присутствия ионов Ca²⁺ и Mg²⁺, а также Mn²⁺. В присутствии Mg²⁺ фермент расщепляет каждую цепь двухцепочечной ДНК независимо друг от друга, случайным образом. В присутствии Mn²⁺ расщепление обеих цепей двухцепочечной ДНК происходит приблизительно в одном и том же месте, при этом концы фрагментов ДНК - тупые или выступающие на 1-2 нуклеотида.

Применение:

• Получение препаратов РНК, не содержащих примеси ДНК;
• расщепление матрицы ДНК после транскрипции in vitro;
• обратная транскрипция;
• мечение ДНК методом ник-трансляции (с использованием ДНК-полимеразы I);
• изучение взаимодействий «ДНК-белок» методом футпринтинга;
• получение библиотек вставок ДНК, перекрывающихся случайным образом.

Фермент комплектуется двумя 10-кратными реакционными буферами - с MgCl₂ и без MnCl₂

Важно! ДНКаза I чувствительна к физической денатурации - не перемешивать на вортексе или пипетированием. Перемешивать только переворачиванием пробирки.

Условия хранения: -20^оС

Ингибитор RiboLock ингибирует активность РНКаз А, В и С по неконкурентному механизму в соотношении 1 : 1. Не ингибирует эукариотические РНКазы T1, T2, U1, U2, CL3 и прокариотические РНКазы H и I.

Работает в большинстве реакционных смесей и защищает РНК от деградации при температурах до +55^оС.

Рекомендуемая рабочая концентрация - 1 ед/мкл.

В состав буфера для хранения входит ДТТ, который обеспечивает стабильность ингибитора, но не является необходимым компонентом реакционной смеси.

Области применения:

• Предохранение РНК от деградации при транскрипции и трансляции in vitro, обратной транскрипции, амплификации РНК, выделении мРНК-протеинового комплекса из клеток млекопитающих;
• выделение и хранение РНК;
• исследование специфической РНКазной активности.

Условия хранения: -20^оС

Ингибитор РНКаз RiBond ингибирует рибонуклеазную активность эукариотических ферментов, таких как РНКаза A, РНКаза B, РНКаза C, и защищает РНК от неспецифического гидролиза. Представляет собой рекомбинантный белок массой 50 кДа, экспрессируемый в E.coli, предназначен для использования в приложениях, где присутствие РНКаз может снизить качество результатов экспериментов, например при выделении РНК, синтезе кДНК, ОТ-ПЦР, транскрипции и трансляции in vitro.

Условия хранения: -20 °С.

Готовые колонки Bio-Spin и Micro Bio-Spin
Различные колонки для очистки ДНК, РНК и белков от солей, нуклеотидов, красителей и малых молекул после ник-
трансляции, концевого мечения, флуоресцентного секвенирования, для замены буферных солей в мультиплексных
рестрикционных анализах;

Готовые колонки Bio-Spin и Micro Bio-Spin
Различные колонки для очистки ДНК, РНК и белков от солей, нуклеотидов, красителей и малых молекул после ник-
трансляции, концевого мечения, флуоресцентного секвенирования, для замены буферных солей в мультиплексных
рестрикционных анализах;

Готовые колонки Bio-Spin и Micro Bio-Spin
Различные колонки для очистки ДНК, РНК и белков от солей, нуклеотидов, красителей и малых молекул после ник-
трансляции, концевого мечения, флуоресцентного секвенирования, для замены буферных солей в мультиплексных
рестрикционных анализах;

Готовые колонки Bio-Spin и Micro Bio-Spin
Различные колонки для очистки ДНК, РНК и белков от солей, нуклеотидов, красителей и малых молекул после ник-
трансляции, концевого мечения, флуоресцентного секвенирования, для замены буферных солей в мультиплексных
рестрикционных анализах;

Готовые колонки Bio-Spin и Micro Bio-Spin
Различные колонки для очистки ДНК, РНК и белков от солей, нуклеотидов, красителей и малых молекул после ник-
трансляции, концевого мечения, флуоресцентного секвенирования, для замены буферных солей в мультиплексных
рестрикционных анализах;

Готовые колонки Bio-Spin и Micro Bio-Spin
Различные колонки для очистки ДНК, РНК и белков от солей, нуклеотидов, красителей и малых молекул после ник-
трансляции, концевого мечения, флуоресцентного секвенирования, для замены буферных солей в мультиплексных
рестрикционных анализах;

Готовые колонки Bio-Spin и Micro Bio-Spin
Различные колонки для очистки ДНК, РНК и белков от солей, нуклеотидов, красителей и малых молекул после ник-
трансляции, концевого мечения, флуоресцентного секвенирования, для замены буферных солей в мультиплексных
рестрикционных анализах;

Готовые колонки Bio-Spin и Micro Bio-Spin
Различные колонки для очистки ДНК, РНК и белков от солей, нуклеотидов, красителей и малых молекул после ник-
трансляции, концевого мечения, флуоресцентного секвенирования, для замены буферных солей в мультиплексных
рестрикционных анализах;

Готовые колонки Bio-Spin и Micro Bio-Spin
Различные колонки для очистки ДНК, РНК и белков от солей, нуклеотидов, красителей и малых молекул после ник-
трансляции, концевого мечения, флуоресцентного секвенирования, для замены буферных солей в мультиплексных
рестрикционных анализах;

• Набор для высокопроизводительного выделения 96 образцов;
• формат – 96-луночный планшет;
• протокол с вакуумной фильтрацией;
• органическое выделение РНК.

Набор предназначен для удаления загрязняющей ДНК из образцов РНК и для удаления ДНКаз после их применения. Не требуется органическая экстракция или термическая инактивация.

Преимущества набора DNA-free DNA Removal Kit:

• быстрая процедура очистки РНК (около 30 минут);
• эффективно удаляет ДНКазу и двухвалентные катионы из реакционной смеси всего за 3 минуты;
• в протоколе не применяется органическая экстракция, добавление ЭДТА или термическая инактивация;
• применяемая в наборе ДНКаза I сертифицирована на отсутствие примесей РНКаз.

Очищенная РНК может использоваться для следующих приложений:

• обратная транскрипция;
• ПЦР в реальном времени;
• нозерн-блоттинг;
• микрочиповый анализ (microarray).

Условия хранения и перевозки: при -20°С, за исключением воды, не содержащей нуклеаз (может храниться при комнатной температуре).

Наборы GeneJET Plasmid Miniprep предназначены для выделения плазмидной ДНК из бактерий с использованием технологии спин-колонок. Сорбция происходит на мембране из диоксида кремния. Набор позволяет получить до 20 мкг высококопийной плазмидной ДНК за одну процедуру выделения.

Преимущества набора GeneJET Plasmid Miniprep:

• процедура выделения занимает менее 14 минут;
• не требуется экстракция фенолом/хлороформом или осаждение спиртом;
• очищенная ДНК немедленно готова к использованию;
• совместим с вакуумным коллектором для увеличения пропускной способности;
• оптимизирован для выделения ДНК бактерий.

Выделенная набором GeneJET Plasmid Miniprep ДНК пригодна для следующих молекулярно-биологических манипуляций:

• рестрикции и модификации;
• автоматизированного флуоресцентного и радиоактивного секвенирования;
• ПЦР;
• in vitro транскрипции;
• трансформации.

Состав набора GeneJET Plasmid Miniprep:

• раствор для ресуспендирования клеток;
• раствор для лизиса клеток; раствор для нейтрализации лизата;
• промывочный раствор (концентрат);
• раствор РНКазы А;
• буфер для элюции;
• спиновые колонки;
• трубки для сбора элюата;
• подробный протокол работы.

Культуру клеток собирают и лизируют. Затем лизат очищают центрифугированием и наносят на колонку с кремнеземом для селективного связывания молекул ДНК при высокой концентрации соли. Адсорбированную ДНК промывают для удаления загрязнений, а чистую плазмидную ДНК элюируют в небольшом объеме элюционного буфера или воды.

Условия хранения и перевозки - комнатная температура.

Наборы серии GeneJET предназначены для выделения ДНК и РНК из различных биологических источников с использованием технологии спин-колонок. Сорбция происходит на мембране из диоксида кремния.

С помощью данного набора можно выделить геномную ДНК (длина фрагментов - свыше 30 тыс. п.н.) из культур животных клеток, образцов животных тканей, цельной крови, бактерий и дрожжей.

Выделенная ДНК пригодна для большинства молекулярно-биологических экспериментов - ПЦР, гибридизации, рестрикции и др.

Условия хранения: комнатная температура

Наборы серии GeneJET предназначены для выделения ДНК и РНК из различных биологических источников с использованием технологии спин-колонок. Сорбция происходит на мембране из диоксида кремния.

Данный набор предназначен для выделения суммарной РНК из различных биологических образцов - культур животных клеток, животных тканей, человеческих клеток крови, бактерий и дрожжей.

С помощью набора GeneJET можно получить препарат чистой РНК (А260/280 > 1.9) с длиной фрагментов не менее 200 нуклеотидов. Полученная РНК пригодна для молекулярно-биологических экспериментов, таких, как обратная транскрипция, ОТ-ПЦР, ОТ-количественная ПЦР и гибридизация.

Условия хранения: комнатная температура