NovaDye Terminator Cycle Sequencing Kit v3.1 (аналог BigDye)— готовый набор реагентов предназначенный для циклического секвенирования по методу Сэнгера с использованием флуоресцентно-меченых терминирующих трифосфатов. Реакция секвенирования проводится путем циклической элонгации ДНК с нуклеотид-специфическим терминированием флуоресцентными аналогами нуклеотидов. Набор представляет собой более экономичную и качественную альтернативу реагентам BigDye Terminator v3.1, Thermo Fisher.
Основные характеристики набора
- Аналог BigDye;
- реакционную смесь 2.5X NovaDye Terminator Mix рекомендуется разбавлять буфером 5Х Dilution NovaDye Sequencing Buffer в 2-8 раз (в зависимости от параметров матрицы) для достижения максимальной эффективности реакции;
- для получения более воспроизводимых результатов секвенирования рекомендуется готовить реакцию в объеме 20 мкл, однако допустимо сокращение реакционного объема до 10 мкл;
- работа с набором не требует оптимизации протоколов, используемых для работы с реагентами BigDye Terminator v3.1, настройки генетического анализатора сохраняются, дополнительная калибровка не нужна. Флуоресцентные красители NovaDye Terminator Mix полностью совместимы с набором спектральных стандартов секвенирования BigDye Terminator v3.1 (4404312 Thermo Fisher);
- средняя длина прочтений с качеством не ниже QV20 не менее 800 п.н.;
- набор совместим с различными генетическими анализаторами 3130, 3500, 3730, SeqStudio, G и A16 (ГТЗ), Нанофор-05, Honor-1616.
Состав набора и условия хранения
Компонент | SQ4211 | SQ4112 | SQ4700 |
100 реакций | 1000 реакций | 100 реакций (без контрольных материалов) | |
Реакционная смесь 2.5X NovaDye Terminator Mix | 800 мкл |
8 мл (10 пробирок×800 мкл) |
800 мкл |
Контрольная ДНК Control dsDNA template (50 ng/µl) | 50 мкл | 50 мкл | ̶ |
Контрольный праймер Control primer M13 (5 µМ) | 50 мкл | 50 мкл | ̶ |
Буфер для секвенирования 5X NovaDye Dilution Sequencing Buffer |
2 мл (2 пробирки×1,0 мл) |
12 мл |
6 мл (4 пробирки×1,5 мл) |
Деионизованная вода Deionized PCR Grade Water |
1 мл | ̶ | ̶ |
Хранение компонентов набора: от - 15 до - 25 °С в течении 12 месяцев.
Транспортирование: при температуре от - 15 до - 25 °С.