Молекулярное клонирование, модификация нуклеиновых кислот

X-gal, известный как 5-бром-4-хлор-3-индолил-бета-D-галактопиранозид, представляет собой хромогенный субстрат для фермента бета-галактозидазы. В процессе расщепления этого субстрата ферментом происходит отделение индольной структуры, которая затем окисляется и преобразуется в осадок синего цвета. Эта характеристика находит широкое применение в областях клеточной и молекулярной биологии.

Основное использование X-gal заключается в анализе активности гена-репортера lacZ, который кодирует бета-галактозидазу в клетках бактерий, дрожжей и животных. В растительных клетках для анализа активности используется репортерный ген GUS, с X-gal в качестве маркера активности.

Кроме того, X-gal применяется в сочетании с гликозидазными конъюгатами в качестве реагента для вторичного обнаружения в методиках иммуногистохимии и ELISA.

Благодаря тому, что бета-галактозидаза остается активной в фиксированных клетках и тканях, X-gal эффективно используется для детекции её активности.