Ферменты Выбраны параметры: Vazyme, Китай

ДНК-полимераза с «горячим» стартом Phanta Max является высокоточной ДНК-полимеразой с частотой ошибок амплификации в 53 раза ниже, чем у Taq ДНК-полимеразы, и в 6 раз ниже, чем у Pfu ДНК-полимеразы, и со скоростью амплификации в 4-150 раз выше чем у классических ДНК-полимераз. Phanta Max способна амплифицировать длинные фрагменты, например такие как 40 kb ДНК фага лямбда, 40 kb плазмидной ДНК, 20 kb геномной ДНК и 10 kb кДНК, обладает хорошей устойчивостью к ингибиторам ПЦР и может использоваться для прямой ПЦР (без предварительного выделения ДНК) бактерий, грибков, тканей растений, тканей животных и даже образцов цельной крови. ДНК-полимераза Phanta Max инактивирована специфическими моноклональными антителами, ингибирующими активность фермента при комнатной температуре, что дает возможность проводить подготовку реакции амплификации при комнатной температуре и исключает образование неспецифических ПЦР-продуктов. При амплификации образуются продукты имеющие «тупые» концы.

Преимущества высокоточной ДНК-полимеразы с «горячим» стартом Phanta Max

• Точность амплификации в 52 раза выше, чем у Taq ДНК-полимеразы, и в 6 раз выше, чем у Pfu ДНК-полимеразы;
• скорость амплификации в 4-150 раз выше, чем у классической Taq ДНК-полимеразы;
• высокая устойчивость к ингибиторам;
• оптимизированная буферная система широко применима к образцам разного типа;
• может использоваться для прямой ПЦР (без предварительного выделения ДНК) бактерий, грибков, тканей растений, тканей животных, образцов цельной крови.

Условия хранения: -20 °С.

Champagne Taq ДНК-полимераза с «горячим» стартом ингибирована специально разработанными Champagne Taq антителами и остается неактивной даже при 55 ℃, что препятствует образованию неспецифических продуктов до начала амплификации и позволяет проводить пробоподготовку при комнатной температуре. При температуре 95 ℃ или более, антитела Champagne Taq полностью инактивируются, и происходит активация Champagne Taq ДНК-полимеразы, что гарантирует, высокую эффективность и чувствительность амплификации. Активация Champagne Taq ДНК-полимеразы не зависит от pH буфера, ионной силы и других факторов, хорошо совместима для различных систем ПЦР и кПЦР.

Преимущества Champagne Taq ДНК-полимеразы

• Активация фермента происходит за 30 секунд при 95 ℃;
• обеспечивает высокую специфичность и чувствительность ПЦР;
• хорошая совместимость фермента с различными условиями ПЦР и кПЦР.

Комплект поставки:

Компонент	P122-d1 500 e.a. (2.5 e.a./мкл)	P122-d2 500 e.a. (5 e.a./мкл)	P122-d3 500 e.a. (10 e.a./мкл)
Буфер 10×Champagne Taq (Mg2+)	2×1 мл	2×1 мл	2×1 мл
Смесь dNTPs (10 мМ каждого)	400 мкл	400 мкл	400 мкл
Champagne Taq ДНК-полимераза (2.5 e.a./мкл)	200 мкл	----	----
Champagne Taq ДНК-полимераза (5 e.a./мкл)	----	100 мкл	----
Champagne Taq ДНК-полимераза (10 e.a./мкл)	----	----	50 мкл

Условия хранения: -20 °С.

Дезоксирибонуклеаза I (ДНКаза I) — это экзонуклеаза, которая разрушает одно- или двунитевуюДНК(дцДНК). Фермент узнает и разрушает фосфодиэфирные связи с образованием одного дезоксинуклеотида или одно- или двухцепочечного олигодезоксинуклеотида с 5'-фосфорилированным и 3'-гидроксилированным концами. Ионы двухвалентных металлов (кальций, магний, марганец) регулируют активность ДНКазы I. В присутствии ионов магния фермент неспецифически узнает и разрушает дц ДНК рандомно на любой из полипептидных цепей, а в присутствии ионов марганца фермент узнает и разрывает практически одни и те же участки на обеих цепях ДНК, образуя фрагменты ДНК с «тупыми» или «липкими» концами.

Хранение/транспортировка: при -30 до -15 °C / при ≤0 °C.

T4 полинуклеотидканаза катализирует перенос и обмен фосфатной группы из γ-положения АТФ на 5'-гидроксильный конец двух- и одноцепочечных ДНК и РНК, и нуклеозид-3'-монофосфатов. Т4 полинуклеотидкиназа также обладает 3'-фосфатазной активностью, которая катализирует удаление 3'-фосфатные группы с 3'-фосфатных концов олигонуклеотидов, дезокси-3'-монофосфатных нуклеозидов и дезокси-3'-дифосфатных нуклеозидов. Выделена из штамма E.coli, содержащего клонированный ген полинуклеотидкиназы из бактериофага Т4. Фермент требует присутствия в реакции АТФ.

Применение T4 полинуклеотидкиназы

• 5'-фосфорилирование ДНК или РНК для последующего лигирования;
• концевое мечение ДНК или РНК для получения зондов и секвенирования ДНК;
• удаление 3'-фосфорильных групп.

Комплект поставки: T4 полинуклеотидканаза, 10× буфер для проведения реакции.

Условия хранения: -20 °С.

Протеиназа K, субтилизиноподобная сериновая протеаза, обладает широкой субстратной специфичностью и преимущественно расщепляет эфирные и пептидные связи на С-конце гидрофобных, серосодержащих и ароматических аминокислот.

Хранение/транспортировка: хранить при температуре от 15 до 25 °C до 3 месяцев или при температуре от 2 до 8 °C для длительного хранения / при комнатной температуре.

Рибонуклеазы (РНКазы) — большая группа гидролитических ферментов, способных расщеплять молекулы рибонуклеиновой кислоты. Это нуклеазы, катализирующие распад РНК на мелкие компоненты. Рибонуклеаза А является пищеварительным ферментом, секретируемым поджелудочной железой коров, который специфически «переваривает» или гидролизует полимеры РНК (но не ДНК) путем расщепления эндонуклеазой фосфодиэфирных связей, образующих ковалентные связи между соседними рибонуклеотидными остатками в этих молекулах.

РНКаза А (рибонуклеаза А) — это фермент высокого качества, способный разделять одноцепочечную РНК по цитозиновым и урациловым остаткам.

Применяется для удаления РНК во время процедур выделения плазмидной и геномной ДНК.

Эндонуклеаза этого типа может расщеплять фосфодиэфирную связь между 5'-рибозой нуклеозида и фосфатной группой 3'-рибозы соседнего пиримидиннуклеозида, результатом этой реакции является получение 3'-пиримидинмононуклеотида или олигонуклеотида, оканчивающегося на 3'-пиримидиннуклеотид.

Буква «А» в названии относится не к его субстратной специфичности, а к преобладающей форме вещества животного происхождения. Не модифицирована, тогда как РНКазы В, С и D представляют собой смеси гликоформ.

Благодаря своей доступности в больших количествах и высокой чистоте РНКаза А стала объектом эпохальных исследований в области химии белков и энзимологии. Кроме того, цитотоксические варианты и гомологи фермента продемонстрировали полезность в качестве химиотерапевтических средств.

Применение РНКазы А

• Удаление РНК из препаратов плазмидной и геномной ДНК;
• удаление РНК из препаратов рекомбинантных белков.

Комплект поставки: РНКаза А.

Условия хранения: -20 °С.

Обратная транскриптаза HiScript II — это новое поколение обратной транскриптазы вируса мышиного лейкоза Молони (обратная транскриптаза M-MLV (RNase H-)). По сравнению с обратными транскриптазами предыдущего поколения, термостабильность данного продукта значительно улучшена. Время полужизни при 50 °С превышает 240 минут. При 55 °С фермент также может быть стабильным в течение длительного времени, что значительно улучшает транскрипцию РНК-матриц со сложной вторичной структурой. Кроме того, фермент обладает улучшенным сродством к матрице и повышенной эффективностью синтеза кДНК. Обратная транскриптаза HiScript II обладает хорошей устойчивостью к большинству ингибиторов ОТ-ПЦР, и пригодна для амплификации длинных фрагментов кДНК длиной до 20 тыс. п.н.

Комплект поставки:

Компонент	R201-01, 2000 ед. акт.	R201-02, 10000 ед. акт.
Буфер 5×HiScript II	500 мкл	500 мкл
Обратная транскриптаза HiScript II (200 ед/мкл)	10 мкл	50 мкл

За единицу активности принимается количество фермента, катализирующее включение 1 нмоль dTТP в кислотонерастворимый продукт за 10 мин при +37 °С с использованием Poly(rA)-Oligo(dT) в качестве матрицы/праймера.

Условия хранения: -30 ~ -15 °С.

Обратная транскриптаза HiScript III Reverse Transcriptase — это улучшенная версия обратной транскриптазы HiScript II, предназначенная для проведения эффективной реакции обратной транскрипции при 37 °С. Данная транскриптаза обладает высокой термостабильностью своего предшественника HiScript II обратной транскриптазы. При проведении реакции обратной транскрипции по матрице РНК имеющей сложную вторичную структуру, температура реакции может быть повышена до 50 ~ 55 °С, без возникновения ингибирующего эффекта на синтез кДНК. Кроме того, данный продукт также обладает превосходной способностью к длительному синтезу и повышенной устойчивостью к инигбиторам.

Комплект поставки:

Компонент	R302-01, 10000 ед. акт.
Буфер 5×HiScript III	500 мкл
Обратная транскриптаза HiScript III (200 ед/мкл)	50 мкл

За единицу активности принимается количество фермента, катализирующее включение 1 нмоль dTТP в кислотонерастворимый продукт за 10 мин при +37 °С с использованием Poly(rA)-Oligo(dT) в качестве матрицы/праймера.

Условия хранения: -30 ~ -15 °С.

Обратная транскриптаза M-MLV (H-) представляет собой мутантную версию обратной транскриптазы дикого типа с отсутствующей активностью РНКазы H, полученную путем целенаправленной мутации. По сравнению с обычными мутантами, полученными методом удаления домена РНКазы Н, этот продукт сохраняет полную структуру белка и, следовательно, обладает той же полимеразной активностью, что и дикий тип. Его можно использовать для синтеза более длинных фрагментов кДНК и создания полноразмерных библиотек кДНК.

Преимущества обратной транскриптазы M-MLV (H-)

• Не обладает активностью РНКазы Н;
• синтез фрагментов кДНК длиной до 3 кб;
• стабильная и надежная производительность обратной транскрипции для образцов РНК с концентрацией выше 100 нг;
• может использоваться для экспериментов, таких как RACE (Rapid Amplification of cDNA Ends), построения библиотеки кДНК.

Комплект поставки:

Компонент	R021-01, 10000 e.a.
Буфер 5×О	500 мкл
Обратная транскриптаза M-MLV (H-) (200 ед/мкл)	50 мкл

Условия хранения: -20 °С.