FlowRACS, автоматизированная система сортировки отдельных клеток, основанная на технологии диэлектрического гистерезиса в высокоскоростном потоке жидкости pDEP-RACS (positive dielectrophoresis-based Raman-activated droplet sorting), позволяет определять характеристики клеток на основе метаболических феномов и сортировать их на высокой скорости с помощью спектров комбинационного рассеяния света. FlowRACS работает с клетками без маркировки или окрашивания, в процессе анализа клетки сохраняют жизнеспособность.
FlowRACS не требует изоляции и культивирования, напрямую идентифицирует отдельные виды клеток и может анализировать метаболизм субстрата, синтез веществ, сети взаимодействия метаболитов, экологический стресс, межвидовые взаимодействия и т. д. в параллельных группах метаболических фенотипов и их межклеточную гетерогенность.
В процессе анализа клетки выстраиваются в линию и последовательно на высокой скорости проходят через точку опроса для получения спектра комбинационного рассеяния. После получения спектров собираются только клетки (или микрокапли, содержащие отдельные клетки) с целевыми спектрами комбинационного рассеяния света (т.е. целевыми метаболическими функциями). Пропускная способность FlowRACS в настоящее время составляет 300-600 клеток/мин.
Ее оригинальная технология pDEP-RACS точно улавливает и собирает одноклеточные рамановские сигналы на основе диэлектрического гистерезиса в высокоскоростном потоке жидкости, преодолевая ограничения пропускной способности рамановской сортировки отдельных ячеек и тем самым завершая одноклеточные рамановские сигналы. Интеграция сбора и сортировки отдельных клеток (и экспорта микрокапель).
FlowRACS использует алгоритм анализа полного рамановского спектра, который интерпретирует и ищет рамановский спектр в режиме реального времени. Прибор представляет собой решение нового поколения для быстрого и недорогого профилирования метаболических явлений, функционального анализа природных клеток и ферментов, а также анализа механизмов функционирования сложных биологических систем, и все это с разрешением одной клетки.
Особенности продукта FlowRACS
- Получение спектров комбинационного рассеяния одиночных клеток c исключительным качеством:
- оригинальная технология pDEP-RACS используется для обеспечения точного захвата одиночных клеток на высокой скорости в точке опроса рамановским лазером. Применение диэлектрического гистерезиса эффективно решает проблему слабых рамановских сигналов клеток в высокоскоростном потоке жидкости и обеспечивает высококачественную рамановскую визуализацию;
- полностью автоматизированная высокопроизводительная сортировка отдельных клеток:
- технология диэлектрического детерминированного латерального смещения (pDEP-DLD) используется для достижения эффективной фокусировки для формирования потока одиночных клеток и высокопроизводительной сортировки клеток-мишеней (пропускная способность сортировки 300-600 клеток/мин);
- максимальное сохранение жизнеспособности клеток:
- рамановский сбор и сортировка одиночных клеток выполняются в жидкой среде, которая в наибольшей степени сохраняет активность клеток и целостность генома, не требуют использования внешних меток и могут быть совмещены с последующимс культивированием и секвенированием одиночных клеток;
- интеллектуальный анализ данных:
- алгоритм анализа полного рамановского спектра одиночных клеток в режиме реального времени обеспечивает универсальное решение для анализа метаболического фенотипа отдельных клеток, сортировки и интеллектуального анализа данных.
Технические параметры cортера FlowRACS
- Сортируемыйе объекты — клетки прокариот и эукариот;
- размер клеток, мкм — 5-40;
- рабочая концентрация, КОЕ/мл —10²-10³;
- сортировочная среда — жидкая фаза;
- сортировка методом диэлектрического гистерезиса в потоке жидкости (pDEP-RACS);
- скорость сортировки, событий/мин — до 600;
- скорость анализа, событий/мин — до 720 событий/мин;
- скорость потока жидкости, мкл/мин — 10-40;
- стабильное время работы, час — более 5;
- объектив микроскопа — 10×/50×/60× водоиммерсионный объектив/100×;
- высокоскоростная цветная камера с CCD-матрицей с разрешением 5 Мп;
- спектральное разрешение, см⁻¹ — до 8;
- пространственное разрешение, мкм — до 1,5.
Комплект поставки: сортер клеточный FlowRACS с Раман детектором, Single Cell Biotech, Китай; управляющая станция с монитором, на базе ПК; антивибрационная платформа.